产品货号：
JN5005
中文名称：
Taq DNA聚合酶(无甘油)
英文名称：
Taq DNA Polymerase(Glycerol-Free)
产品规格：
500U|5000U
发货周期：
1～3天
产品价格：
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本制品是94kDa的耐热性DNA聚合酶，是把Thermus aquaticus DNA Polymerase基因在大肠杆菌中进行表达后经多次纯化分离而得到的。它与天然Taq DNA聚合酶具有相同的功能。使用本制品扩增得到的PCR产物的3'端附有一个"A"碱基，因此可直接克隆于T载体中。本制品不包含甘油等影响冻干工艺的成分，可用于冻干反应体系的配制和产品设计。
- 常规PCR鉴定；
- 小片段目标基因克隆；
- 平端PCR产物加A；
- 双脱氧法测序；
- 荧光定量PCR。
在74℃条件下，30分钟内催化10nmol dNTPs的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量为一个单位。
| 组分 | 500U | 5000U |
| Taq DNA聚合酶(无甘油，5U/μL) | 100μL | 1mL |
| 5×Taq Buffer with Mg2+ | 1mL×2 | 10mL×2 |
保存：-20℃
经多次柱纯化，SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带；qPCR方法检测无大肠杆菌DNA残留，无核酸内、外切酶污染。
5×Taq Buffer with Mg2+不可用于冻干。
使用本试剂扩增得到的PCR产物3'端有一突出"A"碱基，可直接克隆于T载体中。
- 常用反应体系（50μL）：
成分 用量 5×Taq Buffer with Mg2+ 10μL 上游引物 0.2～1.0μM（终浓度） 下游引物 0.2～1.0μM（终浓度） dNTPs(10mM each) 1μL 模板 10ng～1μg（基因组）
或1～50ng（质粒）Taq DNA聚合酶(5U/μL) 0.5～1μL ddH2O 至50μL - 常用PCR反应程序：
- 两步法：
反应阶段 循环数 温度 时间 预变性 1 94℃ 5min 变性 30 94℃ 5s 退火/延伸 68℃ 1kb/60s 终延伸 1 72℃ 5min 保温 1 4℃ - - 三步法
反应阶段 循环数 温度 时间 预变性 1 94℃ 5min 变性 30 94℃ 20s 退火 50～60℃ 20s 延伸 72℃ 1kb/60s 终延伸 1 72℃ 5min 保温 1 4℃ -
- 两步法：
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